微生物薄膜過濾法的計數(shù)結(jié)果計算主要基于微生物限度檢測儀的濾膜上截留的微生物菌落數(shù)，結(jié)合過濾體積和稀釋倍數(shù)進行推算，核心公式為：
CFU/mL=濾膜上菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)/過濾體積（mL）

具體計算步驟與注意事項如下：

一、計算步驟

1. 菌落計數(shù)

• 培養(yǎng)結(jié)束后，統(tǒng)計濾膜上的菌落數(shù)。

• 關(guān)鍵要求：選擇菌落數(shù)在30-300之間的平板進行計數(shù)，以確保結(jié)果準確性。若菌落數(shù)過多（如超過200個），需重新稀釋樣品并過濾。

2. 確定稀釋倍數(shù)

• 若樣品在過濾前進行了稀釋（如將10mL樣品加入90mL無菌水中，稀釋倍數(shù)為10倍），需記錄稀釋倍數(shù)。

• 若未稀釋，稀釋倍數(shù)為1。

3. 計算微生物濃度(示例)

• 過濾體積：100mL

• 稀釋倍數(shù)：10倍

• 濾膜上菌落數(shù)：124個

• 計算：
  $CFU/mL=\frac{124\times 10}{100}=12.4\text{CFU/mL}$

• 若需計算每升樣品中的微生物數(shù)量，則乘以1000：
  $12.4\times 1000=12400\text{CFU/L}$

• 將菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)，再除以過濾體積（mL），得到每毫升樣品中的微生物數(shù)量（CFU/mL）。

二、特殊情況處理

1. 菌落蔓延生長

• 若菌落蔓延成片，無法區(qū)分單個菌落，則該平板不宜計數(shù)，需重新實驗。

2. 稀釋級平行性要求

• 若同稀釋級兩個平板的菌落平均數(shù)不少于15，則兩個平板的菌落數(shù)不能相差1倍或以上，否則需重新實驗。

3. 延長培養(yǎng)時間

• 霉菌、酵母菌培養(yǎng)時間可延長至5-7天，以充分生長并計數(shù)。

三、結(jié)果報告

1. 報告內(nèi)容

• 檢測方法（如薄膜過濾法）、樣品信息、培養(yǎng)條件（溫度、時間）、菌落數(shù)及結(jié)論（是否符合微生物限度標準）。

2. 標準對比

• 根據(jù)藥典或行業(yè)標準（如中國藥典、美國藥典），判斷樣品是否合格。

• 示例：若標準要求每毫升樣品中微生物數(shù)量不超過100CFU，則上述計算結(jié)果（12.4 CFU/mL）符合標準。

四、操作要點

1. 無菌操作

• 確保過濾、培養(yǎng)等環(huán)節(jié)無菌，避免污染。

2. 濾膜選擇

• 根據(jù)微生物大小選擇合適孔徑的濾膜（如0.45μm）。

3. 沖洗濾膜

• 使用無菌緩沖液沖洗濾膜，去除殘留雜質(zhì)和微生物抑制劑。

4. 培養(yǎng)基選擇

• 根據(jù)微生物類型選擇適宜的培養(yǎng)基（如營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基）。